Jakie są metody zakłóceń komórki?

Ciśnienie cieczy ścinającej:

Łamanie komórek przez szybki spadek ciśnienia spowodowany przez przeniesienie próbki z komory wysokiego ciśnienia do komory o niskim ciśnieniu

Zalety: szybkie i skuteczne kruszenie, odpowiednie do pękania komórek o dużej objętości

Wady: może powodować wzrost temperatury próbki (wymagany jest system chłodzenia)

Ultradźwięk

Kruszenie komórek przez ultradźwiękowe zakłócenia wysokiej częstotliwości

Zalety: prosta obsługa

Wady: Może to spowodować wzrost temperatury próbki, trudno ją schłodzić przez system chłodzenia, siła ścinająca może spowodować uszkodzenie białka, hałas jest głośniejszy, a ilość pęknięcia jest mała.

Szklane koraliki

Mielenie komórek z mieszaniem szklanych kulek

Zalety: Bardzo przydatne dla komórek, które są trudne do złamania, takie jak drożdże

Wady: Niektóre są powolne i głośne

Ciśnienie osmotyczne

Od wysokiego ciśnienia osmotycznego do medium o niskim ciśnieniu osmotycznym

Zalety: łatwy w obsłudze, niski koszt

Wady: tylko dla komórek o słabych ścianach zewnętrznych (takich jak komórki zwierzęce)

Powtarzane zamrażanie i rozmrażanie

Łamanie komórek przez wielokrotne tworzenie kryształów lodu; zazwyczaj komórki lizujące w metodzie enzymatycznej

Zalety: łatwa w obsłudze, niska cena i wiele fragmentów błony komórkowej

Wady: powolne, mogą uszkodzić wrażliwe białka lub zakłócić interakcję między białkiem a błoną komórkową, mała wydajność

Rozszczepienie enzymatyczne

Często używane w połączeniu z innymi technologiami, takimi jak wielokrotne zamrażanie-rozmrażanie lub kruszenie osmotyczne; lizozym jest najczęściej stosowanym enzymem do rozbijania ścian komórkowych bakterii.

Zalety: łagodny, może wytwarzać fragmenty błony komórkowej dużej

Wady: powolny, niski plon