Zasada technologii instrumentu PCR

Sonda Taqman znakowana fluoresceiną jest mieszana z matrycowym DNA w celu zakończenia cyklu termicznego denaturacji w wysokiej temperaturze, renaturacji w niskiej temperaturze, umiarkowanego wydłużenia temperatury i przestrzegania zasady reakcji łańcuchowej polimerazy. Sonda Taqman komplementarna do matrycy DNA jest przecięta i fluorescencyjna. Pigment jest wolny w układzie reakcyjnym i emituje fluorescencję pod określonym wzbudzeniem. Wraz ze wzrostem liczby cykli, powielony fragment genu docelowego rośnie wykładniczo, a intensywność sygnału fluorescencji zmienia się wraz ze wzmocnieniem, mierzonym przez detekcję w czasie rzeczywistym. Uzyskuje się wartość CT, a jednocześnie, stosując wiele standardów o znanych stężeniach matrycy jako kontrolę, można uzyskać liczbę kopii genu badanej próbki.